Ero transformanttien ja rekombinanttien välillä

Avainero - Transformanttit vs. rekombinantit
 

Rekombinaatio ja transformaatio ovat kaksi tärkeätä vaihetta geenitekniikassa, jossa organismin ominaisuuksia muutetaan tarkoituksella manipuloimalla sen geneettistä materiaalia. Rekombinaatio on prosessi, jossa vieras DNA sisällytetään vektorigeenoon ja muodostetaan rekombinantti-DNA-molekyyli. Transformaatio on seuraava vaihe, jossa rekombinantti molekyyli viedään isäntäorganismiin. Isäntäsolu tai organismi helpottaa rekombinanttimolekyylin ekspressiota. Avainero transformanttien ja rekombinanttien välillä on transformanttien ovat solut tai organismit, jotka ottavat yhdistelmämolekyylin sisälle ja helpottavat ekspressiota sillä aikaa rekombinantit ovat vektoreita, jotka sallivat vieraan DNA: n insertoinnin genomiinsa ja kulkeutumisen isäntätransformanteihin ekspressiota varten.

SISÄLLYS
1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mitä ovat muuntajat
3. Mitkä ovat rekombinantit
4. Vertailu rinnakkain - Transformanttit vs. rekombinantit
5. Yhteenveto

Mitä ovat muuntajat?

Transformantit ovat soluja tai organismeja, joissa rekombinantti-DNA otetaan talteen ekspressiota varten. Bakteereja käytetään yleisesti isäntäorganismeina geenitekniikassa, koska niitä on helppo kasvattaa, lisääntyä ja käsitellä laboratorio-olosuhteissa, ja muuntamisprosessi on helppo verrattuna muihin organismeihin. Suosituin isäntäbakteeri, jota käytetään geenitekniikassa, on bakteeri E coli.

Transformaatioprosessin aikana isäntäsolut indusoidaan ottamaan rekombinantit. Jotkut isäntäsolut eivät kuitenkaan ota rekombinanttimolekyylejä. Ne tunnetaan ei-muuntajina ja solut, jotka sisältävät yhdistelmä-DNA-molekyylejä sisällä, tunnetaan muunnoksina. Transformanttien valinta ei-transformanteista tehdään käyttämällä valittavissa olevia markkereita molekyylibiologiassa. Valittavat markkerit insertoidaan vektorigeenomiin yhdessä DNA-insertin kanssa. Yleisesti käytetyt valittavat markkerit ovat antibioottiresistenttejä geenejä. Markerigeenit helpottavat transformanttien erilaistumista ja jatkavat prosessia. Transformaatioprosessin jälkeen bakteereja kasvatetaan antibiootteja sisältävässä elatusaineessa. Vain transformantit kykenevät kasvamaan tällä väliaineella, koska niissä on rekombinantteja.

Kun rekombinantti-DNA-molekyyli on transformoitu isäntäorganismin sisällä, vieras DNA voidaan joko integroida isäntäsolun genomiin tai pysyä integroitumattomana sytoplasmassa. Vieras-DNA: n ekspressio ja replikaatio tapahtuvat kuitenkin isäntäorganismissa ja tuottavat prosessista halutun tuloksen.

Mitkä ovat rekombinantit?

Rekombinantti on organismi tai solu, jolla on rekombinoitu genomi, joka sisältää vieraan DNA: n. Rekombinantit ovat tulosta geenitekniikan prosessista. Ne on rakennettu keinotekoisesti in vitro lisäämällä mielenkiinnon kohteena olevat geenit ja muokkaamalla genomia. Usein bakteeriplasmidit ja bakteriofaagit toimivat rekombinanteina geenitekniikassa. Siinä on erilaisten DNA: ien kimeeria. Rekombinantti-DNA-molekyyli kuljettaa vieraan DNA: n isäntäorganismiin ja saa sen ekspressoimaan ja muodostamaan halutun tuotteen.

Yhdistelmämolekyylit rakennetaan käyttämällä restriktioendonukleaaseja ja DNA-ligaaseja. Haluttu DNA-fragmentti erotetaan alkuperäisestä organismista ja insertoidaan vektoriin rekombinantin valmistamiseksi transformaatiota varten. Kiinnostavan geenin leikkaaminen ja vektori-organismin avaaminen tulisi tehdä käyttämällä samaa restriktioentsyymiä, jotta saadaan aikaan yhteensopivia tahmeita päitä niiden yhdistämiseksi. Kun vieras DNA on sisällytetty vektorigeenomiin, se tunnetaan yhdistelmä- tai yhdistelmä-DNA-molekyylinä.

Kuvio 02: Rekombinantti-DNA

Mitä eroa on transformanteilla ja rekombinanteilla??

Transformanttit vs. rekombinantit
Transformantit ovat soluja, joissa on yhdistelmä-DNA-molekyyliä.	Rekombinantit ovat kantajamolekyylejä, joiden vieraassa DNA: ssa on insertoitu omaan genomiin.
Vieraan DNA: n ekspressio
Ne ovat isäntäsoluja, jotka kykenevät ekspressoimaan rekombinantti-DNA: ta.	Niiden pitäisi pystyä replikoitumaan isäntäorganismissa itse.
Valinta
Solut, joita voidaan helposti kasvattaa ja moninkertaistua, valitaan isäntäsoluiksi.	Niiden on oltava helposti uutettavissa ja niiden tulisi sisältää valittavissa olevia merkkejä.

Yhteenveto - Transformanttit vs. rekombinantit

Transformanttit ovat soluja tai organismeja, joiden sisällä on yhdistelmä-DNA-molekyylejä. Rekombinantit ovat organismeja tai soluja, joille on tehty geneettinen rekombinaatio ja joiden genomissa on vieraita DNA: ta. Bakteerisoluja käytetään usein isäntäsoluina transformaatioon, ja plasmideja ja bakteriofageja käytetään usein vektoreina yhdistelmä-DNA-tekniikassa. Tämä on ero transformanttien ja rekombinanttien välillä.

Viitteet:
1. Griffiths, Anthony JF. "Rekombinantti-DNA: n valmistaminen." Johdanto geneettiseen analyysiin. 7. painos. Yhdysvaltain kansallinen lääketieteellinen kirjasto, 1. tammikuuta 1970. Web. 8. huhtikuuta 2017
2. Cooper, Geoffrey M. “Rekombinantti-DNA”. Solu: molekyylinäkökulma. 2. painos. Yhdysvaltain kansallinen lääketieteellinen kirjasto, 1. tammikuuta 1970. Web. 8. huhtikuuta 2017

Kuvan kohteliaisuus:
1. ”Rekombinantti plasmidien muodostuminen”, kirjoittanut Minestrone Soup englannin Wikipediassa (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta